【簡介:】AFLP Analysis( Amplication Fragment Length Polymorphism Analysis)
PCR法擴增片段長度多態(tài)性
AFLP技術原理:
AFLP技術是一項新的分子標記技術,是基于PCR技術擴增基因組D
AFLP Analysis( Amplication Fragment Length Polymorphism Analysis)
PCR法擴增片段長度多態(tài)性
AFLP技術原理:
AFLP技術是一項新的分子標記技術,是基于PCR技術擴增基因組DNA限制性片段,基因組DNA先用限制性內切酶切割,然后將雙鏈接頭連接到DNA 片段的末端,接頭序列和相鄰的限制性位點序列,作為引物結合位點。限制性片段用二種酶切割產生,一種是罕見切割酶,一種是常用切割酶。它結合了RFLP和PCR技術特點,具有RFLP技術的可靠性和PCR技術的高效性。由于AFLP擴增可使某一品種出現(xiàn)特定的DNA譜帶,而在另一品種中可能無此譜帶產生,因此,這種通過引物誘導及DNA擴增后得到的DNA多態(tài)性可做為一種分子標記。
AFLP可在一次單個反應中檢測到大量的片段。以說AFLP技術是一種新的而且有很大功能的DNA指紋技術。
AFLP反應流程:
AFLP反應程序主要包括模板DNA制備,酶切片段擴增及凝膠電泳分析這3個基本步驟。各步驟具體的過程有:
首先要制備高分子量(HMW)基因組DNA,選擇6個堿基識別位點的限制性內切酶(通常是EcoRI或PstI或SacI)。
酶切后的限制性片段在T4連接酶的作用下與特定的接頭相連接,形成帶有接頭的特異性片段。
DNA 片段的預擴增。
在Taq聚合酶的作用下,完成AFLP的選擇性擴增。
PCR產物變性后在含尿素的聚丙烯酰胺變性膠上電泳。
多態(tài)性比較分析,特異片段回收克隆分析。
AFLP技術的應用:
AFLP具有可靠性好,重復性強,可信度高等優(yōu)點,近年來廣泛應用于遺傳育種研究,在動物遺傳育種、動物基因組研究中有著廣泛的應用前景。
1. 構建遺傳連鎖圖譜
2. 利用AFLP快速鑒別與目的基因緊密連鎖的分子標記
3. AFLP輔助的輪回選擇育種
4. 利用AFLP技術研究基因表達與調控
5. 分類和進化研究
6. 甲基化研究
無人機成果精度那有哪些影響因素?
固定翼無人機航空測量系統(tǒng)在進行地形測量時,存在著測量誤差。重慶蘭空無人機公司這些誤差主要來源于儀器誤差、人為誤差、氣候等外界因素影響產生的誤差。
a、儀器誤差
由于儀器設計、制作不完善,或經校驗還存在殘余誤差。這部分誤差主要是傳感器量化過程帶來的系統(tǒng)誤差。
由于固定翼無人機的載重及體積的原因,無法搭載常規(guī)的航攝儀進行測繪航空攝影,自前選用的是中幅面CCD作為傳感器的感光單元,經過加固和電路改裝以后,成為具有穩(wěn)定內方價元索豹數(shù)碼相機。由于感光單元的非正方形因子和非正交性以及畸變差的存在,畸變差的存在使測量成果無法滿足精度要求。
小型數(shù)碼相機一般均為矩形陣面的CCD,并非傳統(tǒng)的正方形。像片重疊度越大基線越短,基高比越小,正常情況下,其基高比為0.15左右,遠小于傳統(tǒng)攝影的0.50,在立體模型下,同名地物交會角較小,降低了立體觀測效果,直接影響高程量測精度。如果在保證具有三度重疊的前提下,盡量減少相片重疊度或使CCD陣面的長邊與攝影航線相一致,可以大大增加基高比,提高高程量測精度
b、人為誤差
由于人的感官鑒別能力、技術水平和工作態(tài)度因素帶來的誤差,以及像控識別、空三加密、立體采集產生的人為誤差。
像控點精度有刺點精度和觀測精度。在觀測精度符合設計要求的情況下,刺點精度成為影響像片控制測量精度的主要因素。由于固定翼無人機的像幅較小,可供選擇像控點位的范圍相對較小,經常會出現(xiàn)在像控點布設的范圍內找不到明顯地物刺點,尤其是在野外居民地稀少地區(qū),像控點選刺在地物棱角是否明顯,影像反差是否理想的地點,都是制約像控點精度的因素。
外業(yè)像控點測量時,對目標點的選取主要取決于影像紋理的豐富程度,影像紋理粗糙、弧形地物、線狀地物交角不好,直接影響了外業(yè)點位選取精度,同時內業(yè)對像控點的轉刺同樣有較大的誤差,較低了成圖精度。如果采取先布設地面目標點后攝影,則能較大提高外業(yè)選點精度和內業(yè)轉刺點精度,有助于提高成圖質量。
內業(yè)數(shù)據采集分為空三加密與立體量測。像控點識別與判讀均會與外業(yè)實際位置產生一定的誤差,空三加密時也會有一定的誤差,還有在立體采集量測時切測的誤差等等。
c、外界因素
由于天氣狀況對飛行器姿態(tài)和成像質量的影響產生的誤差。
對攝影成像來說,景物亮度的大小只影響像片上的曝光量,重要的是像片上相鄰地物影像之間的密度差,如果地物影像之間沒有密度差異,也就是沒有影像反差,也就無法從影像上辨別地物,而決定影像反差的因素除了景物本身特征外,主要取決于陽光部分和陰影部分照度之間的差異,如果選擇天氣條件不好時攝影,必然使影像質量變差。
微型無人機體積較小,一般都在三十公斤之內,在攝影時受氣流、風力、風向影響較大,無法保持直線平穩(wěn)飛行,航線傾角、旁向傾角和旋轉角都很大,飛行姿態(tài)難以控制,飛機在航線前后左右等方向上擺動造成了影像模糊,影像了清晰度。另外,由于遙控無人機采用低空飛行,航高較低,相對地面物體移動速度較快,在曝光過程中,成像面上的地物構像隨之產生位移,形成像移,像移的出現(xiàn)同樣使影像模糊,影響了成像質量。